El control biológico, como alternativa de enfrentamiento a los organismos vectores, se hace cada día más necesario debido al desarrollo de la resistencia a insecticidas. Con el objetivo de caracterizar los ecosistemas fluviales de la provincia Sancti Spíritus, así como los factores antropogénicos y ambientales que influyeron en la permanencia y distribución de la ictiofauna larvívora, se realizaron seis muestreos en 90 ecosistemas fluviales de los ocho municipios que conforman la provincia. Los datos obtenidos fueron comparados con los resultados de muestreos realizados en las décadas anteriores. Se identificaron 15 especies de peces agrupadas en 12 géneros y seis familias y 33 especies de mosquitos. El análisis del contenido estomacal de cuatro especies de peces demostró ser un indicativo de la actividad biorreguladora y la interacción entre los peces endémicos y naturalizados con los introducidos. Se demostró la alta capacidad biorreguladora de las especies Gambusia punctata y G. puncticulata, evidenciándose cambios en las poblaciones de la ictiofauna fluvial espirituana actual, consistente en el incremento del número de géneros y especies.